In vitro efficacy of Duddingtonia flagrans against nematodes of sheep based on in vivo calculations / Eficácia in vitro de Duddingtonia flagrans contra nematoides de ovinos com base em cálculo in vivo

Abstract Duddingtonia flagrans has been tested as an alternative parasite control, but data from in vitro experiments based on in vivo calculations describing nematophagous fungi predation in nematodes are restricted. The objective of this work was to determine the efficacy of D. flagrans against sheep nematode larvae in vitro using in vivo calculations. Fecal samples were introduced to fungi in different concentrations: 0.0/control; 0.05; 0.1; 0.2; 0.4; 0.8; 1.6; 3.2; and 6.4 g corresponding, respectively, to 583.000; 1.166.000; 2.332.000; 4.664.000; 9.328.000; 18.656.000; 37.312.000 and 74.624.000 chlamydospores/kg of body weight. The material was incubated for 14 days, before the larvae recovery (Assay 1). Assay 2 was carried out with the doses of 0.00625; 0.0125; and 0.025 g. The results showed a negative correlation between fungal concentrations and larval numbers for both assays. The fungus demonstrated an efficacy above 89% in both assays. Thus, we consider that the data from in vitro studies based on in vivo calculations may optimize the fungi quantities for field experiments.

Resumo Duddingtonia flagrans tem sido testado como uma alternativa no controle de parasitos, entretanto, trabalhos in vitro da predação de nematoides por fungos nematófagos correlacionados com cálculos baseados para testes in vivo são restritos. O objetivo deste trabalho foi determinar a eficácia in vitro de D. flagrans contra larvas de nematoides de ovinos tendo como base cálculos in vivo. Amostras fecais receberam a adição do fungo em diferentes concentrações: 0.0/controle; 0,05; 0,1; 0,2; 0,4; 0,8; 1,6; 3,2 e 6,4 gramas correspondendo, respectivamente, às seguintes dosagens: 583.000; 1.166.000; 2.332.000; 4.664.000; 9.328.000; 18.656.000; 37.312.000 e 74.624.000 clamidósporos/Kg de peso vivo animal. O material foi incubado por 14 dias, para recuperação das larvas (Ensaio 1). O Ensaio 2 foi realizado com concentrações de 0,00625; 0,0125 e 0,025 g. Foi observada correlação negativa entre a concentração fúngica e o número de larvas, nos dois ensaios. O fungo demonstrou eficácia acima de 89% em ambos os ensaios. A partir destes dados, acreditamos que ensaios in vitro baseados em cálculos in vivo podem aprimorar as dosagens para a realização de experimentos a campo.

Duddingtonia flagrans no controle de nematoides gastrintestinais de equinos em fases de vida livre / Control of free living gastrointestinal nematodes of horses using Duddingtonia flagrans

O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade predatória do fungo Duddingtonia flagrans contra larvas infectantes (L3) de nematoides gastrintestinais na pastagem e no bolo fecal de equinos, em um período de 21 dias. O delineamento experimental foi inteiramente ao acaso, com três grupos tratados (G1, G2 e G3) e um controle (C), com oito animais/grupo. Os tratados receberam 1,5x105; 3x105 e 6x105 clamidósporos de D. flagrans/kg-1peso vivo animal, G1, G2 e G3, respectivamente, durante 21 dias, com administração a cada três dias. Foram delimitadas 36 áreas de 1m2 cada, equivalendo a repetições em triplicata para cada grupo. As fezes foram coletadas dos animais nos dias 0 (D0), 15 (D15) e 30 (D30 = sete dias após a última administração dos tratamentos) e depositadas nessas áreas de pastagem. O número de larvas presentes nos bolos fecais e na pastagem foi avaliado após 14 e 21 dias de cada etapa de deposição. A avaliação da atividade predatória de D. flagrans na pastagem e nos bolos fecais demonstrou que a redução do número de L3 nos bolos fecais foi acompanhada pelo aumento da variável na pastagem. Não se constatou diferença significativa entre os grupos avaliados em decorrência da temperatura média registrada durante o período. As avaliações realizadas em um curto período podem ser insuficientes para a avaliação do efeito do fungo.(AU)

The aim of this study was to evaluate the predatory activity of the fungus Duddingtonia flagrans against infective larvae (L3 ) of gastrointestinal nematodes of horses in the pasture and dung patch during a period of 21 days. The experimental design was completely randomized, with three groups treated (G1, G2 and G3) and a control (C), with eight animals/group. The treated animals received G1: 1.5x105; G2: 3x105 and G3: 6x105 chlamydospores of D. flagrans/kg body weight during 21 days. The experiment ran in the environment using 36 areas of 1 m2 delimited on pasture, where stool samples were distributed for each group, in triplicates. Feces were collected from the animals at days 0 (D0), 15 (D15) and 30 (D30) and deposited on the pasture areas. After 14 and 21 days of each deposition step , the number of L 3 present in dung and pasture was evaluated. The number of L3 in the dung was accompanied by increase of the same variable in the pasture. The evaluation recorded in a short period may be insufficient to evaluate fungus development.(AU)

Predatory activity of Butlerius nematodes and nematophagous fungi against Haemonchus contortus infective larvae / Atividade predatória de nematóides Butlerius e fungos nematófagos contra larvas infectantes de Haemonchus contortus

Abstract The purpose of this study was to evaluate the predatory activity of the nematode Butlerius spp. and fungal isolates of Duddingtonia flagrans, Clonostachys rosea, Arthrobotrys musiformis and Trichoderma esau against H. contortus infective larvae (L3) in grass pots. Forty-eight plastic gardening pots containing 140 g of sterile soil were used. Panicum spp. grass seeds (200 mg) were sown into each pot and individually watered with 10 mL of tap water. Twelve days after seeding, the pots were randomly divided into 6 groups (n=8). Two thousand H. contortus infective larvae (L3) were added to each group. Additionally, the following treatments were established: Group 1 – 2000 Butlerius spp. larvae; group 2 – A. musiformis (1x107 conidia); group 3 – T. esau (1x107 conidia); group 4 – C. rosea (1x107 conidia), group 5 – D. flagrans (1x107conidia) and Group 6 – no biological controller (control group). The larval population of H. contortus exposed to Butlerius spp. was reduced by 61.9%. Population reductions of 90.4, 66.7, 61.9 and 85.7% were recorded in the pots containing A. musiformis, T. esau, C. rosea and D. flagrans, respectively. The results of this study indicate that the predatory nematode Butlerius spp. and the assessed fungi display an important predatory activity can be considered suitable potential biological control agents.

Resumo O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade predatória do nematoide Butlerius spp. e isolados fúngicos de Duddingtonia flagrans, Clonostachys rosea, Arthrobotrys musiformis e Trichoderma esau contra larvas infectantes (L3) de Haemonchus contortus em vasos plantados com Panicum spp. Foram utilizados quarenta e oito potes plásticos de jardinagem contendo 140 g de solo estéril, 200 mg de sementes de Panicum spp.. Cultivar colonião, foi semeado em cada vaso e, diariamente, molhados com 10 mL de água da torneira. Doze dias após, os vasos foram divididos em 6 grupos (n = 8), e duas mil L3 de H. contortus foram adicionadas a cada vaso. Foram estabelecidos os seguintes tratamentos: Grupo 1 - 2.000 larvas de Butlerius spp.; Grupo 2 - A. musiformis (1x107 conídios); grupo 3 - T. esau (1x107 conídios); grupo 4 - C. rosea (1x107 conídios); grupo 5 - D. flagrans (1x107conidia); e Grupo 6 – somente L3 de H. contortus que serviu como controle negativo. A população de L3 de H. contortus expostas a Butlerius spp. foi reduzida em 61,9%. Redução populacional de 90,4, 66,7, 61,9 e 85,7% foram observadas nos vasos contendo A. musiformis, T. esau, C. rosea e D. flagrans, respectivamente. Os resultados deste estudo indicaram que o nematoide Butlerius spp. e os fungos avaliados exibiram importante atividade predatória e podem ser considerados como agentes de controle biológico.

In vitro efficacy of Duddingtonia flagrans against nematodes of sheep based on in vivo calculations

Abstract Duddingtonia flagrans has been tested as an alternative parasite control, but data from in vitro experiments based on in vivo calculations describing nematophagous fungi predation in nematodes are restricted. The objective of this work was to determine the efficacy of D. flagrans against sheep nematode larvae in vitro using in vivo calculations. Fecal samples were introduced to fungi in different concentrations: 0.0/control; 0.05; 0.1; 0.2; 0.4; 0.8; 1.6; 3.2; and 6.4 g corresponding, respectively, to 583.000; 1.166.000; 2.332.000; 4.664.000; 9.328.000; 18.656.000; 37.312.000 and 74.624.000 chlamydospores/kg of body weight. The material was incubated for 14 days, before the larvae recovery (Assay 1). Assay 2 was carried out with the doses of 0.00625; 0.0125; and 0.025 g. The results showed a negative correlation between fungal concentrations and larval numbers for both assays. The fungus demonstrated an efficacy above 89% in both assays. Thus, we consider that the data from in vitro studies based on in vivo calculations may optimize the fungi quantities for field experiments.

Resumo Duddingtonia flagrans tem sido testado como uma alternativa no controle de parasitos, entretanto, trabalhos in vitro da predação de nematoides por fungos nematófagos correlacionados com cálculos baseados para testes in vivo são restritos. O objetivo deste trabalho foi determinar a eficácia in vitro de D. flagrans contra larvas de nematoides de ovinos tendo como base cálculos in vivo. Amostras fecais receberam a adição do fungo em diferentes concentrações: 0.0/controle; 0,05; 0,1; 0,2; 0,4; 0,8; 1,6; 3,2 e 6,4 gramas correspondendo, respectivamente, às seguintes dosagens: 583.000; 1.166.000; 2.332.000; 4.664.000; 9.328.000; 18.656.000; 37.312.000 e 74.624.000 clamidósporos/Kg de peso vivo animal. O material foi incubado por 14 dias, para recuperação das larvas (Ensaio 1). O Ensaio 2 foi realizado com concentrações de 0,00625; 0,0125 e 0,025 g. Foi observada correlação negativa entre a concentração fúngica e o número de larvas, nos dois ensaios. O fungo demonstrou eficácia acima de 89% em ambos os ensaios. A partir destes dados, acreditamos que ensaios in vitro baseados em cálculos in vivo podem aprimorar as dosagens para a realização de experimentos a campo.

Control of infective larvae of gastrointestinal nematodes in heifers using different isolates of nematophagous fungi / Controle de larvas infectantes de nematóides gastrintestinais de novilhas por diferentes isolados dos fungos nematófagos

The effect of different nematophagous fungi [Duddingtonia flagrans (AC001 and CG722) and Monacrosporium thaumasium (NF34)] with regard to controlling infective larvae (L3) of nematodes after gastrointestinal transit in female cattle (3/4 Holstein × Zebu) was evaluated. A total of 24 pubescent female cattle were used, weighing approximately 320 kg each one. There were three treatment groups, each contained six animals that received 150 g of pellets (0.2 g of mycelium), orally in a single dose, in a sodium alginate matrix containing mycelial mass of the fungus D. flagrans (AC001 or CG722) or M. thaumasium (NF34); and one control group (without fungi). Fecal samples were collected from the animals at intervals of 12, 15, 18, 21, 24, 48, and 72 hours. At the end of 17 days, the L3 not subjected to predation were recovered by means of the Baermann method. The fungal isolates tested were capable of destroying the L3 after gastrointestinal transit. It was observed that within 72 hours, the isolates AC001, CG722, and NF34 showed a higher predatory activity (81.2%, 97.3%, and 98.3%, respectively). The results justify the need for studies in the field, and over longer intervals, in order to observe the efficiency of the fungus D. flagrans, or even M. thaumasium, for environmental control over nematodes in naturally infected cattle.

No presente estudo, foi avaliado o efeito de diferentes fungos nematófagos [Duddingtonia flagrans (AC001 e CG722) eMonacrosporium thaumasium (NF34)] no controle de larvas infectantes (L3) de nematóides após o trânsito gastrointestinal em fêmeas bovinas (3/4 Holandês x Zebu). Um total de 24 fêmeas bovinas pubescentes foram utilizadas, pesando aproximadamente 320 kg cada. Foram utilizados três grupos de tratamento; cada um contendo seis animais que receberam por via oral de 150 g de péletes (0,2 g de micélio), em dose única, em uma matriz de alginato de sódio contendo massa micelial dos fungos D. flagrans (AC001 ou CG722), M. thaumasium (NF34), além de um grupo controle (sem fungo). Amostras de fezes foram colhidas dos animais em intervalos de 12, 15, 18, 21, 24, 48 e 72 horas. No final de 17 dias, as L3 não predadas foram recuperadas pelo método de Baermann. Os isolados de fungos testados foram capazes de destruir as L3 após trânsito gastrointestinal. Observou-se após 72 horas, os isolados AC001, CG722 e NF34 mostraram uma maior atividade predatória (81,2%, 97,3% e 98,3%, respectivamente). Estes resultados justificam a necessidade de estudos a campo e em intervalos mais longos, a fim de observar a eficácia dos fungos D. flagrans ou mesmoM. thaumasium no controle ambiental dos nematóides de bovinos naturalmente infectados.

First report of interaction of nematophagous fungi on Libyostrongylus douglassii (Nematoda: Trichostrongylidae) / Primeiro relato da interação de fungos nematófagos sobre Libyostrongylus douglassii (Nematoda: Trichostrongilidae)

Libyostrongylus douglassii is a gastrointestinal nematode parasite of ostriches that can cause up to 50% mortality in young birds. The objective of this study was to compare the predatory capacity of two isolates of the predatory fungi Duddingtonia flagrans(AC001 and CG722 isolates) and one of Arthrobotrys cladodes (CG719) on infective larvae (L3) of L. douglassii under laboratory conditions, in 2% water-agar medium. The results showed that the fungi tested were effective in preying upon the L3 of L. douglassii (P < 0.05), compared with the control group. However, there was no difference in predatory capacity between the fungi tested (P > 0.05) during the seven days of experimental testing. In comparison with the control, without fungus, there were significant decreases (P < 0.05) of 85.2% (AC001), 81.2% (CG722) and 89.2% (CG719) in the average numbers of L3 of L. douglassii recovered from treatments with the isolates tested. In the present study, the three isolates of the predatory fungi D. flagrans (AC001 and CG722) and A. cladodes (CG719) were efficient at in vitro destruction of the L3 of L. douglassii.

Libyostrongylus douglassii é um nematóide parasito gastrintestinal de avestruzes que pode causar até 50% de mortalidade em aves jovens. O objetivo deste trabalho foi comparar a capacidade predatória de dois isolados de fungos predadores Duddingtonia flagrans (isolados AC001 e CG722) e um Arthrobotrys cladodes (CG719) sobre larvas infectantes (L3) de L. douglassii em condições laboratoriais, em meio ágar­água 2%. Os resultados demonstraram que os fungos testados foram eficientes em predar as L3 de L. douglassii (P < 0,05) em relação ao grupo controle. Contudo, não foi observada nenhuma diferença na capacidade predatória entre os fungos testados (P > 0,05) durante os sete dias do ensaio experimental. Em comparação ao controle, sem fungo, houve uma redução significativa (P < 0,05) de 85,2% (AC001); 81,2% (CG722) e 89,2% (C719) na média de L3 recuperadas nas placas do grupo tratado com os isolados testados. No presente trabalho, os três isolados de fungos predadores D. flagrans (AC001 e CG722) e A. cladodes (CG719) foram eficientes na destruição in vitro das L3 de L. douglassii.

Proteolytic action of the crude extract of Duddingtonia flagrans on cyathostomins (Nematoda: Cyathostominae) in coprocultures / Ação proteolítica do extrato bruto de Duddingtonia flagrans sobre ciatostomíneos (Nematoda: Cyathostominae) em coproculturas

The objective of this study was to examine the action of the crude extract of Duddingtonia flagrans (isolates AC001 and CG722) on infective larvae (L3) of cyathostomins in coprocultures and to confirm its proteolytic activity by means of a zymogram. The following groups were formed in coprocultures: Group 1: 10 mL of crude extract of D. flagrans (AC001); group 2: 10 mL of crude extract of AC001 with 10 mM of Ca2+; group 3: 10 mL of crude extract of D. flagrans (CG722); group 4: 10 mL of crude extract of CG722 with 10 mM of Ca2+; and group 5: control group (distilled water). The third-stage larvae (L3) were obtained after eight days. The crude extract of D. flagrans was effective in reducing the number of L3, with the following percentage reductions: group 1, 49.5%; group 2, 52.5%; group 3, 36.8%; and group 4, 57.7%; in relation to the control group (p > 0.05). The proteolytic activity of the crude extract was confirmed through the zymogram. The results from this study confirmed that the crude extract of the fungus D. flagrans could be used for controlling cyathostomin L3, and suggested that at least one protease of approximately 38 kDa was present.

O objetivo deste trabalho foi estudar a ação do extrato bruto de Duddingtonia flagrans (isolados AC001 e CG722) sobre larvas infectantes (L3) de ciatostomíneos em coproculturas e confirmar a sua atividade proteolítica por meio de um zimograma. Foram formados os seguintes grupos em coproculturas: grupo 1: 10 mL de extrato bruto de D. flagrans (AC001); grupo 2: 10 mL de extrato bruto de AC001 com íons Ca2+ 10 Mm; grupo 3: 10 mL de extrato bruto de D. flagrans (CG722); grupo 4: 10 mL de extrato bruto de CG722 com íons Ca2+ 10 Mm; e grupo 5 como controle (água destilada), obtendo-se as L3 ao final de 8 dias. O extrato bruto de D. flagrans foi eficiente na redução do número de L3 com os seguintes percentuais de redução: grupo 1 (49,5%); grupo 2 (52,5%); grupo 3 (36,8%) e grupo 4 (57,7%) em relação ao grupo controle (p > 0,05). Confirmou-se a atividade proteolítica por meio do zimograma. Os resultados do presente trabalho confirmam a utilização do extrato bruto do fungo D. flagrans no controle de L3 de ciatostomíneos e sugere a presença de pelo menos uma protease de aproximadamente 38 kDa.

In vitro predatory activity of conidia of fungal isolates of the Duddingtonia flagrans on Angiostrongylus vasorum first-stage larvae

INTRODUCTION:Angiostrongylus vasorum is a nematode that parasitizes molluscs, dogs, and even man. METHODS:The objective was to evaluate the predatory activity of the conidia of two fungal isolates of Duddingtonia flagrans (AC001 and CG722) on first-stage larvae (L1) of A. vasorum in laboratory conditions. RESULTS: At the end of the experiment, there were significant reductions (p<0.01) of 74.5% and 63.2%, on average, in the A. vasorum (L1) recovered in the AC001 and CG722 treatment conditions, respectively. CONCLUSIONS: The two isolates of fungi were efficient in the capture and destruction of A. vasorum (L1).

In vitro biological control of infective larvae of Ancylostoma ceylanicum / Controle biológico in vitro de larvas infectantes de Ancylostoma ceylanicum

The aim of this study was to evaluate the predatory activity of the fungus Duddingtonia flagrans (AC001) on infective larvae of Ancylostoma ceylanicum after gastrointestinal transit in hamsters. Twenty animals were used in the experiment, divided into two groups: a treated group (10 animals) and a control group (10 animals). In the group treated with D. flagrans, each animal received mycelium from the AC001 isolate, at an oral dose of 5 mg/25 g of live weight. To evaluate the predatory activity of the fungus, fecal samples were collected from the animals in both groups, at the times of 6, 8, 12, 24 and 36 hours after the treatment. Then, subsamples of 2 g of feces were placed in Petri dishes containing 2% water-agar (2% WA) culture medium and 1000 L3 of A. ceylanicum. Over the study period, the following percentage reductions were observed: 43.2% (6 hours), 30.8% (8 hours), 25.8% (12 hours), 30% (24 hours) and 11% (36 hours). The fungus D. flagrans presented predatory activity on the L3 of A. ceylanicum, after passing through the hamsters' gastrointestinal tract. It was therefore concluded that the fungus D. flagrans may be an alternative for biological control of the L3 of A. ceylanicum.

O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade predatória do fungo Duddingtonia flagrans (AC001) sobre larvas infectantes de Ancylostoma ceylanicum após o trânsito gastrintestinal em hamsters. Foram utilizados vinte animais no experimento, divididos em dois grupos: um grupo tratado (10 animais) e um grupo controle (10 animais). No grupo tratado com D. flagrans, cada animal recebeu 5mg/25g de peso vivo de micélio do isolado AC001, por via oral. Para avaliar a atividade predatória do fungo, amostras fecais foram coletadas de ambos os grupos de animais nos horários de: 6, 8, 12, 24 e 36 após o tratamento. A seguir, 2g de fezes foram colocadas em placas de Petri contendo o meio de cultura ágar-água 2% (AA2%) e 1000 L3 de A. ceylanicum. Ao longo dos horários estudados os seguintes percentuais de redução foram observados: 43,2% (6 horas); 30,8% (8 horas); 25,8% (12 horas); 30% (24 horas) e 11% (36 horas). O fungo D. flagrans (AC001) apresentou atividade predatória sobre as L3 de A. ceylanicum após o trânsito pelo trato gastrintestinal de hamsters. Além disso, foi observada uma diferença significativa nos percentuais obtidos de cada horário em relação ao numero de L3 recuperadas (P < 0,01). Conclui-se, portanto, que o fungo D. flagrans pode ser uma alternativa de controle biológico das L3 de A. ceylanicum.

Control of Strongyloides westeri by nematophagous fungi after passage through the gastrointestinal tract of donkeys / Controle de Strongyloides westeri por fungos nematófagos após trânsito gastrintestinal em jumentas

Strongyloides westeri is the most prevalent nematode among equines aged up to four months and causes gastrointestinal disorders. The objective of this study was to observe the control of infective S. westeri larvae (L3) by the nematophagous fungi Duddingtonia flagrans (AC001) and Monacrosporium thaumasium (NF34) after passage through the gastrointestinal tract of female donkeys. Twelve dewormed female donkeys that were kept in stables were used. Two treatment groups each comprising four animals received orally 100 g of pellets made of sodium alginate matrix containing a mycelial mass of either D. flagrans (AC001) or M. thaumasium (NF34). The control group consisted of four animals that received pellets without fungus. Feces samples were then collected from the animal groups at different times (after 12, 24, 48 and 72 hours). These feces were placed in Petri dishes containing 2% water-agar medium and 1000 L3 of S. westeri. AC001 and NF34 isolates showed the ability to destroy the L3, after gastrointestinal transit, thus demonstrating their viability and predatory activity.

O Strongyloides westeri é o nematóide de maior prevalência entre equídeos com idade até quatro meses, causando distúrbios gastrintestinais. O objetivo do presente trabalho foi observar o controle de larvas infectantes (L3) de Strongyloides westeri pelos fungos nematófagos Duddingtonia flagrans (AC001) e Monacrosporium thaumasium (NF34) após trânsito gastrintestinal em jumentas. Foram utilizadas 12 jumentas, estabuladas e previamente vermifugadas. A seguir, dois grupos tratados, contendo cada um 4 animais receberam por via oral 100 g de péletes em matriz de alginato de sódio, contendo massa miceliana dos fungos D. flagrans (AC001) ou M. thaumasium (NF34). O grupo controle foi constituído de 4 animais que receberam péletes sem fungo. A seguir, amostras de fezes dos grupos de animais foram coletadas em distintos intervalos de horas (12, 24, 48 e 72). Essas fezes foram vertidas em placas de Petri contendo meio sólido ágar-água 2% e 1000 L3 de S. westeri. Os isolados AC001 e NF34 apresentaram capacidade de destruir as L3 após o trânsito, demonstrando sua viabilidade e atividade predatória.

Atividade larvicida do extrato bruto enzimático do fungo Duddingtonia flagras sobre larvas de primeiro estádio de Angiostrongylus vasorum / Larvicidal activity of a crude enzyme extract of the fungus Duddingtonia flagrans on first-stage larvae of Angiostrongylus vasorum

INTRODUÇÃO: Angiostrongylus vasorum é um nematóide que parasita cães domésticos e eventualmente o homem. MÉTODOS: O objetivo deste trabalho foi observar a atividade predatória in vitro do extrato bruto enzimático do fungo Duddingtonia flagrans sobre larvas de primeiro estádio A. vasorum em condições laboratoriais no meio ágar-água 2 por cento. RESULTADOS: Ao final do experimento, os percentuais de redução das L1 de A. vasorum observados foram de: 53,5 por cento (24h) e 71,3 por cento (48h) CONCLUSÕES: O extrato bruto enzimático do fungo D. flagrans destruiu in vitro as L1, podendo ser utilizado como controle biológico desse nematóide.

INTRODUCTION: Angiostrongylus vasorum is a nematode parasite of domestic dogs and potentially of humans. METHODS: This study aimed to observe the predatory activity in vitro of a crude enzyme extract of the fungus Duddingtonia flagrans on first-stage larvae of A. vasorum in laboratory conditions on 2 percent water-agar. RESULTS: At the end of the experiment, the percentage reductions observed for A. vasorum L1 were 53.5 percent (24h) and 71.3 percent (48h). CONCLUSIONS: Crude enzyme extract of the fungus D. flagrans destroyed the L1 in vitro and can be used as a biological control for this nematode.

Observação in vitro da ação dos fungos nematòfagos Duddingtonia flagrans, Monacrosporium thaumasium e Pochonia chlamydosporia sobre ovos de Eurytrema coelomaticum / In vitro evaluation of the action of the nematophagous fungi Duddingtonia flagrans, Monacrosporium thaumasium and Pochonia chlamydosporia on Eurytrema coelomaticum eggs

Objetivou-se a observação in vitro da ação dos fungos nematófagos Duddingtonia flagrans (AC001), Monacrosporium thaumasium (NF 34) e Pochonia chlamydosporia (VC1 e VC4) sobre ovos de Eurytrema coelomaticum. Os ovos foram vertidos em superfície de ágar-água 2 por cento contendo os isolados fúngicos e em AA 2 por cento sem fungo como controle. Ao completarem sete, 10 e 14 dias, aproximadamente os ovos foram removidos e classificados de acordo com os seguintes parâmetros: efeito tipo 1, efeito lítico sem prejuízo morfológico a casca do ovo; tipo 2, efeito lítico com alteração morfológica da casca e embrião e tipo 3, efeito lítico com alteração morfológica do embrião e da casca, além de penetração de hifas e colonização interna do ovo. Os isolados AC001 e NF34 não demonstraram percentuais para o efeito do tipo 3, contudo o isolado VC1 apresentou resultados percentuais para o efeitodo tipo 3 que determinam a atividade ovicida de um fungo: 27,2 por cento aos sete dias, 23,1 por cento aos 10dias e 25,0 por cento aos 14 dias. Da mesma forma que isolado VC4 apresentou: 15,0 por cento aos sete dias, 25,4 por cento aos 10 dias e 21,8 por cento aos 14 dias respectivamente. Pochonia chlamydosporia é um fungo promissor que pode ser usado no controle biológico de E. coelomaticum.

The present study assessed in vitro action of nematophagous fungi species Duddingtonia flagrans (AC 001), Monacrosporium thaumasium (NF 34) and Pochonia chlamydosporia (VC1 and VC4) on eggs of Eurytrema coelomaticum. Eggs were placed on Petri dishes with fungus isolate grown in water- agar 2 percent and in the control (no fungus). After seven, 10 and 14 days, the eggs were removed and classified according to the following parameters: type 1, lytic effect without morphological damage to eggshell; type 2, lytic effect with morphological alteration of embryo and eggshell; and type 3, lytic effect with morphological alteration of embryo and eggshell, besides hyphal penetration and internal egg colonization. The isolate AC001 andNF34 had not demonstrated percentages to type 3 effects, however isolated VC1 presented results percentages for the type 3 effect that it determines the ovicida activity of one fungus: 27.2 percent to the seven days, 23.1 percent to the 10 days and 25.0 percent to the 14 days. The isolated VC4 presented: 15.0 percent to the seven days, 25.4 percent to the 10 days and, 21.8 percentto the 14 days. P. chlamydosporia is a promising fungus can be used in the biological control of E. coelomaticum.

Duddingtonia flagrans: controle biológico de nematodeos de bovinos a campo / Duddingtonia flagrans: biological control of cattle nematodes in the field

O controle biológico é um método para diminuir uma população pela utilização de antagonista natural. No presente estudo, testou-se a eficácia do fungo nematófago Duddingtonia flagrans no controle de nematódeos parasitos gastrintestinais de bovinos criados à campo no município de Júlio de Castilhos. Foram utilizados 20 bezerros, distribuídos igualmente em duas áreas formadas por pastagem nativa. O grupo A foi tratado com o fungo D. flagrans, cultivado em sorgo, numa concentração de 1x10(6)clamidósporos kg-1 de peso animal, misturados em ração de manutenção, diariamente, durante oito meses. O grupo B serviu como controle e não recebeu fungo, apenas ração. Foram coletadas amostras para contagem de ovos por grama de fezes (OPG) semanalmente. Mensalmente, foram realizadas coproculturas para identificar as espécies de larvas de nematódeos, a pesagem dos animais e a coleta de pasto para contagem das larvas na pastagem. Dados de temperatura e índice pluviométrico foram registrados diariamente. O OPG foi reduzido no grupo tratado, em média 56,8, por cento nos últimos três meses de experimento, variando entre 40,4 e 67,1 por cento no grupo tratado (P<0,001). A coprocultura demonstrou que os principais nematódeos encontrados em ambos os grupos foram dos gêneros Cooperia e Haemonchus. A contagem de larvas na pastagem obteve um percentual de redução 77,1 por cento no grupo tratado ao final do experimento (P<0,01). Pôde-se concluir com este estudo que o papel do fungo Duddingtonia flagrans, é, sem dúvida, importante, principalmente, na diminuição do OPG e na redução significativa de larvas na pastagem. Portanto, este fungo nematófago é uma ferramenta biológica eficaz para ser empregado em um controle integrado de nematódeos de bovinos criados a campo.

Biological control is an alternative method to reduce parasite's population by the use of natural antagonist. In the present study, efficacy of nematophagous fungus Duddingtonia flagrans was tested to control gastrointestinal nematodes parasites of cattle livestock in the field. Twenty calves were used, distributed equally in two distinct plots formed by native pasture. Group A was treated with D. flagrans fungus, cultivated in sorghum (1x10(6) clamidospores kg-1 body weight) mixed with maintenance ration, each day, during eight months. Group B served as a control and did not receive the fungus. Samples for faecal egg count (FEC), were collected each week. There were monthly counts in faecal cultures to identify the species of nematodes larvae, animals weight, blood collection to determine red cell counts and collection of pasture to larvae counting. Temperature and rainfall data were registered daily. The FEC reduced around 56.8 percent in the last three months of the experiment, with a variation between 40.4 and 67.1 percent in the treated group (P<0.001). The faecal cultures demonstrated that the main nematodes found in both the groups were Cooperia and Haemonchus. Larvae counting in the pasture showed a reduction percentage around 77.1 percent in treated group at the end of experiment (P<0.01). It could be concluded with this study, that Duddingtonia flagrans has an important role in the reduction of FEC and significant reduction of larvae in the pasture. Therefore, this nematophagous fungus is efficient as a biological tool to be used in an integrated nematodes control of bovine raised in the field.

Observação in vitro da ação dos isolados fúngicos Duddingtonia flagrans, Monacrosporium thaumasium e Verticillium chlamydosporium sobre ovos de Ascaris lumbricoides (Lineu, 1758) / In vitro observation of the action of isolates of the fungi Duddingtonia flagrans, Monacrosporium thaumasium and Verticillium chlamydosporium on the eggs of Ascaris lumbricoides (Linnaeus, 1758)

Observou-se a ação in vitro dos fungos nematófagos Duddingtonia flagrans, Monacrosporium thaumasium e Verticillium chlamydosporium sobre ovos de Ascaris lumbricoides. Após sete, dez e quatorze dias de interação, o fungo promissor a ser utilizado no controle biológico de Asaris lumbricoides foi o Verticillium chlamydosporium (26-30 por cento). Os outros fungos não foram satisfatórios.

The in vitro action of the nematophagous fungi Duddingtonia flagrans, Monacrosporium thaumasium and Verticillium chlamydosporium on eggs of Ascaris lumbricoides was observed. After 7, 10 and 14 days of interaction, the fungus showing most promise for use in biologically control over Ascaris lumbricoides was Verticillium chlamydosporium (26-30 percent). The other fungi did not present satisfactory results.